奧林巴斯CX33暗場顯微鏡在觀察菌絲孢子方面具有較高的分辨率和對比度,能夠清晰地顯示菌絲和孢子的形態結構。以下是一個使用奧林巴斯CX33暗場顯微鏡進行菌絲孢子觀察實驗的詳細步驟:
一、奧林巴斯CX33實驗準備
顯微鏡調試:
將奧林巴斯CX33顯微鏡放置在平穩、光線適宜的實驗臺上,確保臺面穩固且無震動。
連接顯微鏡的電源適配器,并打開電源開關,等待光源穩定亮起。
根據觀察需求,轉動物鏡轉換器,選擇合適倍數的物鏡。通常從低倍物鏡開始觀察,以便找到樣品并確定觀察區域。
調節雙目鏡筒的間距,使其與自己雙眼的間距相適應,以獲得舒適、清晰的雙目視覺效果。
若發現雙眼看到的圖像有差異,可分別調節雙目鏡筒上的屈光度調節環,使雙眼都能清晰地看到圖像。
暗場裝置安裝:
在聚光鏡位置安裝暗場聚光鏡,并調節其光圈和孔徑光闌,以獲得最佳的暗場觀察效果。
樣本制備:
從培養好的真菌平板上,用接種環或鑷子挑取少量帶有菌絲和孢子的真菌樣本。
在載玻片中央滴一滴蒸餾水或生理鹽水,將挑取的菌絲孢子樣本放入水滴中,用解剖針或鑷子將菌絲盡量分散開,避免菌絲相互纏繞。
蓋上蓋玻片,注意避免產生氣泡。
二、奧林巴斯CX33觀察步驟
放置樣本:
將制備好的樣本載玻片放置在載物臺上,并用玻片夾固定好。
確保樣本位于載物臺通光孔的中心位置,以便光線能夠充分透過樣本。
對焦與觀察:
通過調節粗調焦旋鈕,使載物臺緩慢上升或下降,同時從側面觀察物鏡與樣本玻片之間的距離,直到物鏡接近樣本但不要接觸到玻片。
通過目鏡觀察,繼續調節粗調焦旋鈕,使載物臺下降,直到能夠看到樣本的大致圖像。
使用微調焦旋鈕進行精細調節,使圖像達到最清晰的狀態。
暗場觀察:
在低倍鏡下,移動載物臺,尋找樣本分布均勻、圖像清晰的區域。
切換到高倍物鏡,進一步觀察菌絲孢子的形態、大小、排列方式等特征。
在暗場觀察模式下,由于只有散射光能夠進入物鏡,因此可以清晰地觀察到菌絲孢子邊緣的對比度增強效果。
三、奧林巴斯CX33注意事項
樣本制備:確保樣本的純凈性和代表性,避免雜質干擾觀察。同時,樣本的固定和染色步驟也需嚴格按照操作規程進行(對于暗場觀察,通常不需要染色)。
顯微鏡調試:在觀察前務必對顯微鏡進行調試,確保各個部件正常工作,鏡頭清潔無污漬。此外,還需根據樣本的特性和觀察需求調節光源亮度和聚光鏡光圈大小。
操作規范:在操作過程中,要遵循無菌操作和實驗室安全規范,避免交叉感染和實驗室事故的發生。
記錄與分析:在觀察過程中,可以使用顯微鏡自帶的數碼攝像頭將觀察到的圖像實時記錄并保存在計算機中,以便后續的分析和比較。
通過以上步驟,使用奧林巴斯CX33暗場顯微鏡可以清晰地觀察到菌絲孢子的形態結構,為真菌學研究提供有力支持。